广州瑞森生物科技有限公司

农药残留检测方法与步骤

检测方法:酶抑制法

依据标准:国标GB/T 5009.199-2003

检测仪器:RS-PR-24农药残留检测仪

  试剂配置

准备:纯净水/蒸馏水(不能用矿泉水/山泉水)、缓冲液。

显色剂:加11毫升缓冲液,粉末溶解、混匀即可。

底物:加11毫升纯净水,粉末溶解、混匀即可。

酶:不用另配,可直接使用。

  样品前处理

1.所有备检样品在检测前无需进行水洗,否则影响数据准确度。

2.叶菜类:至少取不同株上的5片叶片叠加,剪成25px见方秤取2g,加10ml提取液。

3.颜色深叶菜类:对一些叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株蔬菜浸提方法,减少色素干扰。

4.非菜叶类:取果实的表皮,至少4克。用刀从上而下沿表面,削取一片,为增加检测代表性,从不同的3个果实上削取一片,剪成25px2大小,称取4g。

5.豆类:用刀切片,其中毛豆去壳后检测,在浸泡中会有部分白色外皮浸出,检测液需进过滤。

6.水果类:如葡萄、提子、杨梅,整颗提取,取1颗,加提取液10ml,震荡提取5分钟,中间将样品用玻璃棒转位置,使样品各表面充分接触提取液。提取后取2.5ml上清液,再按正常步骤检测。

 特殊样品前处理

部分样品,如葱,蒜,萝卜,韭菜,芹菜,香菜,以及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性,处理这类样品的时候,可采取整株处理蔬菜浸泡或淋洗。

 操作步骤

 结果判定

1.△Ac值一定要>0.3,否则计算出来的样品抑制率是错误的,这种情况请重做实验。

(Ac值<0.3的原因:1、操作问题,加样量不准确 2、酶温度太低,或酶失去活性)

2.根据国家标准GB/T5009.199-2003要求,当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上,确保不是操作问题而导致的假阳性。如有必要,可用气相色谱等方法作进一步确认。

3.阳性样品复检,在添加样品名称时,需把样品编号改成初检编号,初检编号可在“查询”中查看。 

4.如需打印数据,请在农残仪页面未清空时打印。页面清空后无法打印之前的数据。可在“查询”,看数据是否已上传。

5.如果需要重新做实验:清空->关上盖子->不放入比色皿,按“通道初始化”

如果需要添加菜名:设置->样品名称->添加

如果需要修改服务器:设置->数据中心->更改->确定

  检测结果处理

1.阴性结果:结果为阴性时,可直接上传至系统;

2.阳性结果:结果为阳性时,检测样品复检多一次,如复检结果为阴性,则可直接上传数据;如复检结果还是为阳性时,则数据上传后,检测样品做退换货处理,并做好退换货记录备查。

  注意事项

1.平时试剂需要放在2~8℃保存,缓冲液可直接放在室温保存,配制好的试剂在使用前,要先恢复到室温,否则会影响结果的准确性,试剂使用前请摇匀。

2.比色皿为易碎材质,需要小心保管,同时实验过程中,请勿碰触比色皿的光滑面,以免影响结果的准确性。

3.试剂避免交叉污染,取出后的试剂不可再打回瓶内。

4.酶配制后经常用10天内用不完的,建议分装为两瓶保存,以避免酶因反复解冻而降低其活性。

5.每加一次试剂,移液器的枪头都必须更换,避免试剂污染。

6.处理色素含量较高的果蔬样品,应采取整株(体)浸提,尽量避免过多色素浸出,干扰测定。若实验室有条件,对色素干扰严重的过滤液,可用活性碳脱色处理.过滤或离心后,取清液作为待测液。

7.葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株浸提,避免次生物质干扰。

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